DNAミスマッチ修復とオリゴヌクレオチド末端保護は、CRISPR/Cas9によるDNA切断から遠位での塩基対置換を促進する

特に、妊婦や若者には、こんなことをやっていそう

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29447381/　

Nucleic Acids Res. 2018 Apr 6;46(6):2945-2955. doi: 10.1093/nar/gky076.

DNA mismatch repair and oligonucleotide end-protection promote base-pair substitution distal from a CRISPR/Cas9-induced DNA break

Tim Harmsen¹, Sjoerd Klaasen¹, Henri van de Vrugt^{1 2}, Hein Te Riele¹

Affiliations

¹ Division of Tumor Biology and Immunology, The Netherlands Cancer Institute, Plesmanlaan 121, 1066 CX Amsterdam, The Netherlands.

² Department of Clinical Genetics, VU University Medical Center, Van der Boechorststraat 7, 1081 BT Amsterdam, The Netherlands.

PMID: 29447381 　PMCID: PMC5888797 　DOI: 10.1093/nar/gky076

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要旨

CRISPR/Cas9によるDNA二本鎖切断（DSB）の一本鎖オリゴデオキシリボヌクレオチド（ssODN）仲介修復は、決められた遺伝子座に小さなゲノム変化を導入するのに有効に利用される。ここでは、DNAミスマッチ修復（MMR）活性が、Cas9によるDNA切断から遠位でヌクレオチド置換を効率的に行うために重要であることを明らかにした。さらに、ssODNの3'末端をホスホロチオエート結合で保護すると、MMR依存の遺伝子編集現象が促進されることがわかった。また、オリゴヌクレオチドを介した遺伝子編集は、テンプレート化された切断修復によって行われることが示唆された。